Адресованная ПцР адресная ПцР

Адресованная ПцР, адресная ПцР * адрасаваная ПЛР, адрасная ПЛР * targeted PCR — метод использования в качестве праймера известной последовательности, гомологичной к заданным специфическим областям генома или к.-л. высокоповторяющемуся фрагменту ДНК. При этом известна природа фрагмента, который изучается, таким образом, нет той неопределенности, которая характерна для фрагментов, выявляемых методами RAPD и AFLP, или для случайных проб ПДРФ. Амплифицированный продукт сравнивают в геле с соответствующим продуктом другого объекта (индивидуума). Для выяснения всех возможных различий необходимо секвенирование фрагмента, при котором выявляется любое различие, а данные обрабатываются статистически. К одному из таких вариантов А. ПЦР относится использование ISSR (Inter-Simple Sequence Repeat) маркеров. В этом случае в качестве одного праймера используют микросателлитный повтор, что в реакции ПЦР приводит к амплификации фрагмента, фланкированного его инвертом. Как и RAPD-PCR, ISSR-PCR не требует предварительного клонирования и секвенирования фрагментов для подбора праймеров. Последние состоят из фрагмента микросателлитного локуса (ди- или тринуклеотидного) и 1-2 «якорных» нуклеотидов на одном из флангов повтора. Этот метод начал развиваться в 1994 г., а к настоящему времени получил широкое распространение, особенно в исследованиях генофондов различных видов организмов.